中區聯醫病理中心

抹片的固定方法

細胞學的目的是在觀察細胞的微細構造，如果一個細胞已經退化或死亡，或取出後沒有立刻固定而被風乾，其微細構造亦會隨之消失，如此細胞診斷便不能達成，所以檢體的固定在抹片的收集過程中，相當重要,直接影響細胞診斷的品管。固定液必須能快速的進入細胞核、膜內，並能跟細胞的微網構造發生強烈而完整的理化作用(固定)，使細胞的一切活動馬上停止，保持原狀。細胞診斷常用的固定液90-100% Alcohol就是作用於細胞內的Protein，使之凝固或變性，使細胞內的微構造不能繼續變動, 而保持採樣時之原狀。

11.1固定液列述如下:

11.1.1 95%Alcohol(Ethanol)：容易取得，已取代Ether和Alcohol混合液，為一般院所方式。

11.1.2噴霧固定液Spray-cyte: 成分為Polyethylene glycol與Isopropanol的Coating
       fixative;塗片尚未乾燥前，自上方15-20公分處向標本均勻噴灑，數分鐘後即可固定
       細胞，又可形成一層保護膜。我們不推薦此方法，因為噴嘴和塗片距離如果不當，
       噴出液之低溫常因冰凍而引起細胞型態之變化或將細胞推成堆以至太厚或產生空泡
       而不易觀察。

11.1.2.1 Spray fixation固定Pap Smear雖然方便，但使用時若不依照噴罐之指示，可能產
       生不良固定效果，導致抹片判讀困難。

11.1.2.2正確的使用方法:
11.1.2.2.1要離開抹片至少15-20公分, 並和抹片成45度, 如果太近可能產生下列情況:

(A) 細胞冷凍的效果 (氣體膨脹溫度會降低)

(B) 噴滴衝力太大，扭曲細胞形態及細胞推積成堆，不易判讀，除保持15-20公分距離，如果
   噴射方向和抹片表面成45度，可減少衝力。

11.1.2.2量不可太多，只需一層薄霜般的固定液即可，如果有固定液流出玻片外，即為用量
         太多。請注意，噴固定液就如同噴髮膠一樣，罐子要離頭髮遠一點，而且薄薄一
         層就夠了。如果你不放心是否噴上足夠的固定液，先用一張報紙，用以上方法噴一
        次，由紙上的濕度，你可肯定噴一次，至多來回很快的噴兩次已經夠多了。如果
         你認為上述技術太難或太麻煩，用 95% 酒精固定仍然是最簡便的方法。

11.1.2.3、Merckofix 噴霧式固定液步驟:

1）抹片平放紙上，噴嘴離抹片15-20公分，並且和抹片成45度角度。

2）用力壓，如果用快速彈跳式壓法，可至多連壓三次，以免過量。讓抹片上之固定液揮發乾
   後(約十分鐘)，儘速送檢，如果延遲送檢抹片須置於乾燥陰涼處，台灣一般之溫度及濕度
   高不易保存，因此儘快送檢為原則。

11.2固定後處理的注意事項:

11.2.1.酒精之固定，並非恆常，固定風乾後，細胞之微細構造會因溫度及濕度再度變形，因
     此固定後之抹片保存及處理非常重要（應避免高溫或高濕）之環境。

11.2.2固定後之抹片應避免和化學物或其vapor接觸，由其是福馬林；因此抹片不可和福馬林
     固定之外科病理檢體包在一起寄送。

11.2.3放抹片之容器以厚紙做的Holder或塑膠盒為佳，不可用木造盒子，因木造盒之膠含有
     福馬林之成份。

11.2.4酒精固定瓶蓋平時應拴緊，以免酒精揮發失去固定作用。瓶內酒精也應定期更換，新
     換之酒精平均可固定100片以上，如果有血、膿等導致酒精混濁也請更換。

11.2.5酒精固定至少30分鐘-長時間之固定，並不影響抹片品質，旦取出風乾後，請儘早送檢。